冷冻精子的性质 与卵母细胞或胚胎干细胞相比,精子细胞体型较小,其细胞内含水量大约50%,细胞膜湿度大(膜流动性高),因为不饱和脂肪酸含量大,可以抵抗快速降温带来的破坏,另因每次分泌出来的精子细胞数以百万计,使精子冷冻的方法区别于且较卵母细胞或胚胎干细胞冷冻方法简单。 | |
精子冷冻方法 普遍采用的精子冷冻方法有2种: |
1. 液氮蒸汽法,液态氮蒸汽冷冻是指迅速降低温度的冷冻方法(速冻),一般在液态氮蒸汽中蒸泡8-30分钟,然后直接放入液态氮中保存。
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2. 计算机控制速率冷冻法是指慢速冷却的冷冻方法(慢速冷冻),通过使用计算机辅助控制(计算机编程冷冻室),分2-3个步骤降低温度,如:第1步从22到 4摄氏度,第2步从4摄氏度降温至-30摄氏度,最后1步从-30摄氏度降温至-140摄氏度,最后储存在-196摄氏度的液氮中。 |
这两种方法都可以帮助保存精子,然而,使用计算机控制慢速冷却,相比液氮蒸汽法能更有效地保持完整的精子形态,以及具有较高的存活率。
精子冷冻原理 |
| 原理是使细胞内脱去部分水分,以减少在降温过程中产生冰 晶体,因为产生冰晶体会导致精子死亡。因此可采用冷冻保 护剂进行防护,防止细胞内产生冰晶体。
精子冷冻取得成功的因素 每个人精子冷冻取得成功与否会存在差异,同一个人每次分 泌情况也存在差别,我们能够通过检测解冻后精子的活动率 来确定精子冷冻是否成功。根据世界卫生组织(WHO)的 标准规定精子冷冻前的精子活动率 ≥ 50%。 |
精子冷冻取得成功的重要因素如下:
1. 冷冻前精子的质量。根据研究发现精子量少于2000万个(少精症)的人在解冻后的精子存活率低于正常人的精子(精子量正常)存活率,因此冷冻前选择活动能力好的精子可以帮助提高精子的存活率。 2. 精子冷冻保护剂的种类和浓度。在冷冻和解冻过程中,通过使用冷冻保护剂,使精子具备抵御不断极度冷冻环境的能力。在进行极度低温储存之前,须注入冷冻保护剂,使精子能调整其渗透度和冰点功能,使精子在冷冻储存后能够抵御冷冻和解冻环境,从而不影响精子的受精能力。 3. 冷冻和解冻时的温度。 使温度降至0摄氏度以下,直至约-80摄氏度(极度冷却)会发生剧烈的变化,在细胞体内和体外都会产生冰晶体,特别是精子细胞内产生冰晶体会导致精子死亡,因此采用合适的降温速度可帮助精子免受产生冰晶体的危害,同时还有助于将细胞内的水分吸出。 |
精子能保存多久 研究发现冷冻方法会影响精子的形态、包膜、顶体以及DNA, 然而,已有报道说采用冷冻21年的精子进行ICSI,以及采用冷冻28年的精子进行人工授精并成功诞生了婴儿的例子。根据对人工授精和试管婴儿方法采用冷冻精子以及采用捐赠精子诞生婴儿的后续研究,发现在很多方面与自然诞生的婴儿不存在区别,包括出生体重、发生早产和死胎的风险、出生婴儿男女XB比例、染色体异常、先天性残疾以及婴儿健康状况。当把精子置于 -196摄氏度冷冻保存,细胞内的各种化学反应停止,唯一能影响冷冻精子的是宇宙射线,它可以破坏精子中的DNA。科学家们预测如果没有宇宙射线的影响,精子能够冷冻保存长达1000年。 | |